通过使用膜再生液，可以实现对同一张膜进行多次Western Blot 检测。室温条件下，将用过 的膜浸泡在膜再生液里，摇床振荡洗涤 5~40 分钟，可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合 的抗体。随后，可以使用不同的抗体进行下一轮Western Blot 实验。膜再生液适宜于少量样品检 测多种蛋白质，即使样品量不受限，采用这一策略多次检测同一张膜上的蛋白，也可省去前期的细胞 培养、给药处理、样品收集、蛋白电泳和转印等多个步骤。 另外，膜再生也可以消除重新处理 和操作带来的系统误差，使结果可比性更强。
膜再生液特点：本试剂无毒无味无害，室温保存和使用，可对同一张膜进行 7 次以上的Western Blot 检测， 不影响抗原蛋白。原则上先检测较难检测的蛋白（如磷酸化蛋白或表达量低的蛋白等）。
使用方法： 1. 将膜充分浸泡于适当体积的膜再生液中，在摇床上室温洗脱 5~20 分钟，时间长短可根据上 次WB 的信号强弱进行优化。 2. 倒掉膜再生液，用水快速洗膜 3~5 次，继续用洗涤液（如TBST 等）漂洗三次。 3. 重新对膜进行封闭和后续处理检测。
注意事项： 1. 理论上，膜再生液可在不影响膜上结合的抗原的条件下将抗体洗脱下来，实际操作中，膜类型、抗 体类型、 抗体浓度及抗原特性等都影响蛋白洗脱难易度。 2. 适用于ECL 和类似的化学发光试剂进行的WB 检测，不适用于非化学发光试剂的WB 检测(如DAB， NBT 或 BCIP)。 3. 用ECL 显色后，再生液洗脱几分钟后，可再次加入 ECL 显色液显影，如胶片上显示条带，表明 抗体未除净， 须进一步在再生液中浸泡洗脱，直至不再显色。 4. 使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA 封闭的膜更容易再生。 5. 在整个操作过程中，应尽量避免让膜干燥。 6. 膜再生液有少量析出为正常现象，不影响效果，使用前请摇匀。
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