本产品只用于科学研究,不能用于临床诊断。
本试剂盒提取的外泌体可用于 NTA 粒径分析,Western Blot,核酸提取及其后 续分析(Q-PCR,测序等),不建议用于外泌体标记和蛋白质质谱分析等。
产品介绍
外泌体(Exosome)是由不同细胞分泌的直径 30-150nm 的胞外膜性囊泡 (Extrocellular visicles,EVs)。外泌体普遍存在于多种体液中,其内容物丰富, 包括蛋白质、脂质、核酸等,在细胞间信息交流中发挥着重要作用,主要参与免 疫抗原呈递,神经递质传递,脂类代谢,及细胞信号转导等过程,并与多种疾病 的发生、发展、治疗及预后密切相关。 密度超速离心作为传统并有效的外泌体分离方法,但其复杂的操作流程,昂 贵的仪器设备,限制了外泌体的常规研究。本公司研制一种外泌体提取试剂,通 过优化多聚物混合物与浓缩后的样品混合,经离心可将外泌体沉淀富集,其操作 步骤简单,用时短,结果稳定,污染蛋白含量较少,只需普通离心机就可以分离 得到较纯的完整外泌体。
常见问题
Q1: 细胞培养时,如何去除培养基中牛血清来源的外泌体?
A1:多数情况下,体外细胞培养时培养基中需要添加牛来源血清,但血清中含 有大量外泌体,会污染细胞分泌的外泌体,影响外泌体后续实验,可以采取以下 两种方法操作: (1) 当细胞长到近乎单层,换成无血清培养基,在 24-48 小时后收集细胞培养 上清。 (2) 将血清以 100,000g 超速离心 10h 以上去除血清外泌体,或者购买商业化 的去除外泌体的血清。 Q2:提取的外泌体如何保存?
A2:短时间内使用,可在 2-8℃保存一周,若长时间保存,建议放在-80℃冰箱 中,避免反复冻融,另外,最好是使用低吸附蛋白的保存管。
Q4:如何鉴定提取的外泌体?
A4:外泌体是体细胞分泌的细胞外囊泡群体中一种,直径一般为 30-150nm,通 常确定外泌体一般需要三个条件:电镜形态观察,颗粒粒径测定和蛋白标志物检 测(Western Blot 检测 CD9,CD81,CD63,Alix,TSG101 等)。
Q5:本试剂盒提取外泌体方法与超速离心方法相比有哪些优势?
A5:主要表现在:操作简单,不需要额外仪器设备,节省时间,可小体积样本提 取等.
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