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超氧化物歧化酶SOD活性检测试剂盒(WST-1法)

超氧化物歧化酶SOD活性检测试剂盒(WST-1法)

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560.00
HYCEZMBIO®

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  • 品牌:HYCEZMBIO®
  • 货号:HYZ311
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超氧化歧化酶(SOD)能够催化超氧阴离子(O2•-)歧化,生成过生成过氧化氢(H2O2)和单质氧气(O2),是一种重要的抗氧化酶。目前有许多间接或者直接测定SOD的方法,其中,其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用,但是,NBT法有几个缺点,例如生成的染料水溶性差,而且会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应。虽然cytochrome C法也常被用来做SOD检测,但它和超氧化物反应过于剧烈,不能测定低水平的SODSOD Assay Kit-WST-1使用了易溶于水的噻唑盐:WST-12-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯基)-2-四唑盐,二钠盐),能够和超氧阴离子反应生成水溶性的染料,因此可以简便地进行SOD的检测。WST-1与超氧阴离子反应的剧烈程度比cytochrome C70倍;因此,它的检测灵敏度非常高,并且能够通过将样品用buffer稀释,使背景的吸光度最小化。WST-1不会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应,因此,能够检测SOD100%的抑制率。WST-1被超氧阴离子还原的比率与黄嘌呤氧化酶的活性线性相关,并且会被SOD所抑制(见下图)。因此,SOD或者SOD类似物的IC50(50%的抑制浓度)就能用比色法来测定。

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1. 基于黄嘌呤氧化酶偶联反应体系和WST-1SOD酶活力检测原理图。XOxanthine oxidase

目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性和灵敏度较好的WST-1法。

WST-1的反应产物是稳定的水溶性产物,可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力,适合高通量筛选研究。同时WST-1法测定SOD酶活力时,最大抑制百分率可以接近100%,并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰,使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。
本试剂盒的性能优于同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT)。本产品的用途与同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT)相同,等量SOD导致的吸光度变化值显著大于NBT法,线性范围更宽。本试剂盒提供的SOD样品制备液能直接裂解细胞,无需匀浆,操作更加便捷。
   本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢,会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法,能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如,对于SOD标准品的检测,标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时,对于检测结果仍无显著影响。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清()、胸水、腹水、肾透析液、尿液、红细胞、白细胞、血小板、心肌培养细胞、肿瘤培养细胞、各种动植物组织细胞级亚细胞等生物样品中的SOD活力。


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