自主研发的蛋白快速染色液可用于 SDS-PAGE 或非变性 PAGE 等蛋白电泳凝胶的快速染色,亦可用于 Western 转膜后 PAGE 胶上残余蛋 白的检测。 该染色液在传统染色液的基础上进行了改良,是一种无味无毒的染色液, 染色快,只染蛋白不染胶,无需脱色, 灵敏度可达到 10 ng 左右。尤其对于蛋 白纯化实验,数分钟后即可根据染色结果决定下一步实验。染色全程易操作, 易 保存,不需要特殊设备,染色后凝胶可在纯水中保存数周。凝胶染液原理与传统 考染相同,可采用相同步骤切胶打 质谱。
使用方法: 1. 将电泳后的 PAGE 胶取下放入塑料容器中,用蒸馏水简单冲洗掉残留的电泳 缓冲液,加入适量染色液覆盖 PAGE 胶,置于摇床上摇动。染液的量取决于胶及 容器的大小,通常约为 20~25 ml。
2. 1-2 min 后条带开始显现,随时间推移染色条带颜色会加深。15 min 后 100 ng 大小的条带即可清晰显现。 通常染色时间可以从 30 min 到过夜均可。背景 颜色不会随染色时间增加而增强。
3. 出现清晰的目标蛋白条带即可停止染色,弃去染色液。染色结束后,可将 蛋白凝胶放置于水中保存或取出 拍照。因蛋白等电点不同,染料瞬时附着能力 不同,建议染色 2 小时以上或过夜,再将凝胶放入水中效果 更佳。此外凝胶置 于水中保存,还可以净化背景。
注意事项: 1. 因本染液呈酸性,出于安全考虑,操作本试剂时应带手套,请勿徒手接触 染液。
2. 染液可重复利用 3 次,随使用次数的增加,染色速度略微下降,但灵敏 度不受影响。
3. 染色时如果把凝胶和染色液一起放置在微波炉中适当加热,可以大大加快 染色速度。但加热时应尽量避 免沸腾,以免出现因暴沸而导致凝胶碎裂。建议 使用中低档加热 90sec 左右,取出后观察或继续摇床染 色。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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